上海一研生物科技有限公司
主營產品: 生化試劑 ELISA試劑盒, 檢測試劑盒, 免疫組化試劑盒, 分子生物學試劑盒
問號鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒
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反應五要素:
問號鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
產品名稱 | 英文名稱 | 規格 |
問號鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒 | Leptospira interrogansPCR | 50T |
普通PCR反應流程:
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
使用方法 :
1 實驗所需器材與試劑
1.1 器材
1)PCR儀
2)PCR反應管
3)電泳儀及水平電泳槽
4)高速離心機
5)微量移液器及移液器吸頭
1.2 試劑
1)瓊脂糖
2)EB(溴化乙錠)
3)去離子水或雙蒸水
注意事項:
5.1使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。
5.2 操作時應盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區域進行,以避免交叉污染。 5.3 實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進行上下倒置多次進行混勻)。
5.4 反應管中加好所有的試劑后,應盡快上PCR儀進行擴增,以免形成過多的二聚體。
5.5細胞培養物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度,建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養2-3天后送樣檢測。
人Podocin ELISA試劑盒 質量規格:0.98Venlafaxine Hydrochloride
人PL7抗體/抗蘇酰tRNA合成酶(PL7)ELISA試劑盒 質量規格:0.99Vecuronium Bromide
人PL12抗體/抗酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒 質量規格:0.98Vanillin
人P53(P53)ELISA試劑盒 質量規格:98%,BR,一水物Valsartan
人P27蛋白(P27)ELISA試劑盒 質量規格:>98%,BRValrubicin Resolution Mixture
人OJ抗體/抗異亮酰tRNA合成酶抗體(OJ/IleRS)ELISA試劑盒 質量規格:>98%,BRValrubicin
人N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯(AcSDKP)ELISA試劑盒 質量規格:>98%,BRValproic Acid
人N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒 質量規格:0.98Valganciclovir Hydrochloride
淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum
雪白根霉厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia
293T(人胚腎細胞)日本根霉 Rhizopus japonicus
大麗輪枝菌 Verticillium dahliea Kleb人成纖維細胞
根瘤菌球毛殼 Chaetomium globosum
負鼠腎細胞香菇 Lentinula edodes
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
植物桿菌 Lactobacillus plantarum喜鹽芽胞桿菌 Halobacillus sp.
黑化大家鼠肺成纖維樣細胞綠色木霉 Trichoderma viride
小鼠肝內膽管上皮細胞完全培養基ACCC40177 Nocardiopsis dassonvillei
大鼠腸上皮細胞完全培養基日本根霉 Rhizopus japonicus
NCI-H1703(人肺鱗細胞)MFC(小鼠胃細胞)
燕麥鐮刀菌 Gibberella avenacea球型芽孢桿菌 Bacillus sphaerious
問號鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒IFNA21/IFNA F 干擾素α21抗體規格:96T/48T英文名稱:Human Nuclear matrix protein 22,NMP-22 ELISA Kit特價促銷
IFNAR2/IFNABR 干擾素α受體2抗體規格:96T/48T英文名稱:Human Argyrophilic nucleolar organizer region proteins,Ag-NORs ELISA Kit特價促銷
IFNA11/Limitin/Interferon alpha 11 干擾素α11抗體規格:96T/48T英文名稱:Human Ribonuclease,RNASE ELISA Kit進口/分裝
IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C 干擾素α10抗體規格:96T/48T英文名稱:Human Melanoma Marker A,MART/Melan-A ELISA Kit特價供應
Otoraplin/OTOR/Fibrocyte derived protein 纖維細胞源性蛋白規格:96T/48T英文名稱:Human melanoma metastasis surface adhesion molecule,MMSAM ELISA Kit 特價供應
HSP10/CPN10 熱休克蛋白10抗體規格:96T/48T英文名稱:Human melanocyte stimulating hormone,MSH ELISA Kit特價促銷
ANGPTL6 生成素相關蛋白6抗體規格:96T/48T英文名稱:Human melanocyte antibody,MC Ab ELISA Kit特價供應
RCAN2/DSCR1L1 鈣調神經磷酸酶調節蛋白2抗體(唐氏綜合征候選區域蛋白1樣蛋白1)規格:96T/48T英文名稱:Human melanomaderived leucine zipper extra-nuclear factor,MLZE ELISA Kit特價促銷