準(zhǔn)備物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀釋液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

普通PCR反應(yīng)流程：

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

反應(yīng)五要素：

巴西利什曼蟲參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

使用方法 ：   

1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑

1.1 器材

1）PCR儀

2）PCR反應(yīng)管

3）電泳儀及水平電泳槽

4）高速離心機(jī)

5）微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1）瓊脂糖

2）EB（溴化乙錠）

3）去離子水或雙蒸水

注意事項(xiàng)：   

5.1使用本試劑前請仔細(xì)閱讀本說明書全文。

5.2 操作時應(yīng)盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個檢測過程中，反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行，以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時，試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻（混勻時禁止激烈振蕩，只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻）。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后，應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增，以免形成過多的二聚體。

5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測靈敏度，建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。

人阿黑皮素原(POMC)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BRDihydrocyclosporin C

人橙(AO)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRDihydrocyclosporin H

人ω干擾素(IFN-ω/IFNB)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Bisdemethoxycurcumin

人γ肽(Pγ)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRagnuside

人γ谷酰轉(zhuǎn)移酶(GGT) ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品talatisamine

人γ谷酰半胱合成酶(γ-ECS)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BROrcinol gentiobioside

人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BROrcinol glucosid

人γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA試劑盒 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRStephanotis

大鼠視網(wǎng)膜微內(nèi)細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL

SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢腺細(xì)胞系

MG-63, 人細(xì)胞gersion

ES-2(人卵巢透明細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)規(guī)格：100次

V-P試劑盒（甲、抗性染乙液）/V-P Reagent(A、B)細(xì)菌V-P試驗(yàn)10毫升×2國產(chǎn)/進(jìn)口

明膠/白明膠/動物膠/筋膠/銀明膠/食用明膠/GelatinCP500克國產(chǎn)/進(jìn)口

褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum植物桿菌 Lactobacillus plantarum

ZR-75-1(人腺細(xì)胞)BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞

U-118 MG(人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus

彎曲桿菌 Lactobacillus curvatus神經(jīng)細(xì)胞

CAL-27(人舌鱗細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

HA標(biāo)簽免疫親和介質(zhì)小鼠單核巨噬細(xì)胞細(xì)胞
巴西利什曼蟲MICB  MHC I類鏈相關(guān)蛋白B規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Calreticulin,CRT ELISA Kit 進(jìn)口/分裝

TAPA1/CD81  CD81抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human cadherln-related neuronal receptor1,CNR-1 ELISA Kit進(jìn)口/分裝

HAND2  和神經(jīng)嵴衍生蛋白2抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human galanin,GAL ELISA Kit進(jìn)口/原裝

MYF5  生肌決定因子Myf5抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human mannan binding lectin associated serine protease,MASP ELISA Kit進(jìn)口/原裝

SCC112/PIG54  細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白54抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Mannose，MN ELISA Kit進(jìn)口/原裝

EBNA1/EBV Nuclear Antigen  EB病毒核抗原1抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Mannma binding protein/mannan binding lectin,MBP/MBL ELISA Kit進(jìn)口/原裝

β-synuclein/SNCB  核突觸蛋白β抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human Mannma binding lectin receptor,MBLR ELISA Kit特價促銷

KDEL (ER Marker)  賴氨酸，天冬氨酸，谷氨酸，亮氨酸相關(guān)序列抗體規(guī)格:96T/48T英文名稱：Human mannose receptor，MR ELISA Kit特價促銷