上海滬崢專業生產銷售奧葉茲基氏病病毒PCR試劑盒現貨，

本試劑盒引物經過優化，反應特異性強，即開即用，歡迎新老客戶咨詢訂購。，本試劑盒引物經過優化，反應特異性強，即開即用，歡迎新老客戶咨詢訂購。

產品詳細信息

中文名稱：奧葉茲基氏病病毒PCR試劑盒

英文名稱：Aujeszky’s Disease Virus(ADV)

產品規格：50T/盒

用途】用于奧葉茲基氏病病毒的檢測、診斷和流行病學調查。

【儲存條件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、運輸、反復凍融次數不超過5次，有效期12個月。

提示：本品僅用于科研實驗，不能用作醫療及臨床診斷。

奧葉茲基氏病病毒PCR試劑盒使用方法

【使用方法】

1. 樣品處理（樣本處理區）

1.1 樣本前處理

組織：取50mg左右組織用玻璃勻漿器勻漿，勻漿后置入潔凈的1.5ml離心管中；
液體標本：取適量標本13000rpm離心2min，棄上清。
1.2 DNA提取

1) 對上述處理好的標本加入40ul 核酸提取液，100℃恒溫處理10分鐘，13,000 rpm離心5分鐘，取上清液轉移至新的1.5ml EP管，-20℃保存；
2. 試劑配制（試劑準備區）

根據代檢測樣本總數，設所需要的PCR反應管管數為N（N=樣本數+1

管陰性對照+1管陽性對照），體系配制如下表：

試劑

WSSV 反應液

酶液

用量（樣本數為N）

20μl

1μl

3. 加樣（樣本處理區）

將步驟1提取的DNA、陽性質控品、陰性質控品各取4μl，加入相應的

反應管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。

4. PCR擴增（核酸擴增區）

4.1 將待檢測反應管置于熒光定量PCR儀反應槽內；

5. 結果分析判定

結果分析條件設定
設置基線（baseline）：一般情況下，對ABI 7500、7700等儀器設為6-15cycle，對PE5700設為3-15cycle,對MJ Research Option2設為6-12cycle。特殊情況可對基線適當調整。
設置閾值（threshold）:以閾值線剛超過陰性對照擴增曲線（無規則的噪音線）的zui高點。
結果判斷
陽性：檢測樣本Ct值小于等于35.0，且曲線有明顯的指數增長期；
可疑：檢測樣本Ct值大于35.0且小于40.0，重復一次實驗，如果Ct值仍小于40.0，且曲線有明顯的指數增長期，為陽性，否則為陰性；
陰性：檢測不到樣本Ct值或Ct值為40。
6. 對檢驗結果的解析

實驗室環境污染，試劑污染，標本交叉污染會出現假陽性結果；試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現假陰性或定量檢測不準確的結果。

7. 質控標準

陰性質控品：擴增曲線無對數生長期或無Ct值顯示；
陽性質控品：擴增曲線有明顯對數生長期，且Ct值≤32;
以上條件應同時滿足，否則實驗視為無效。

6. 檢測方法的局限性

? 樣本檢測結果與樣本收集、處理、運送以及保存質量有關；

? 樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現假陽性結果；

? 陽性對照、擴增產物泄漏，會導致假陽性結果；

? 病原體在流行過程中基因突變、重組，會導致假陰性結果；

? 不同的提取方法存在提取效率差異，會導致假陰性結果；

? 試劑運輸，保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降，出現假陰性或定量檢測不準確的結果；

? 本檢測結果僅供參考，如須確診請結合臨床癥狀以及其他檢測手段。

奧葉茲基氏病病毒PCR試劑盒

◆ 注意事項
1．本試劑檢測靈敏度高。為了防止污染，實驗要分區操作。
   1）*區：樣本制備區。
 2）*區：模板添加區。
   3）第三區：擴增及產物分析區。
   ★ 分區之間*進行物理性隔離，避免人為因素造成的污染。
2．實驗過程中穿戴工作服和乳膠手套，不同區域獨立使用工具，需更換手套和實驗服。
3．嚴格按照操作步驟操作，試劑配制和加樣等步驟請嚴格按照說明書要求在冰盒上操作。
4．反應液中的成分對光敏感，應避光保存。試劑使用前要完全解凍，但應避免反復凍融，推薦使用前離心30秒，并按檢測頻次將反應液以適當體積分管保存。
5．反應結束后，擴增管請置于密封袋內丟棄，當日清理，開蓋易造成氣溶膠污染，禁止開蓋。
6．不同批號試劑請勿混合使用，在有效期內使用。