邦景奧葉茲基氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
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客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析,提供實驗報告給您。
產品名稱:邦景奧葉茲基氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書
英文名稱:Aujeszky's Disease Virus(ADV)
貨號:BJP63282
分類:熒光定量PCR試劑盒
產品僅用于科研儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
染料法
探針法
可進行相對,絕對定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
·電泳圖 ·標準曲線
·溶解曲線 ·擴增曲線
·完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴增相關。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當完整的探針與目標序列配對時,熒光基團發射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切,使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環數的增加,釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產物的數量呈正比關系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14μL N×14μL
酶混合物 1 μL N×1 μL
總量 15 μL N×15μL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
L-二異酯 2217-15-4具棲冬青苷酮酸脫氫酶激酶同工酶4(PDK4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)99%
L-二異酯 2217-15-4姜酮胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)99%
L-二異酯 2217-15-4α-香附酮ⅡD組磷脂酶A2(PLA2G2D)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)99%
1,2,3,4-四氫-1-萘胺 2217-40-5桑根酮D三葉因子3(TFF3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)98%
1,2,3,4-四氫-1-萘胺 2217-40-5連翹酯苷A防御素β1(DEFβ1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)98%
5-溴吲哚啉 22190-33-6千金子二萜二乙酰苯甲酰酯凝血因子Ⅷ(F8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)≥98%
5-溴吲哚啉 22190-33-6歐當歸內酯A載脂蛋白F(APOF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)≥98%
2-叔丁基-6-酚 2219-82-1五味子素載脂蛋白F(APOF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)98%
2-叔丁基-6-酚 2219-82-1氫溴酸東莨菪堿磷脂酰絲氨酸(PS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)98%
磺胺嘧啶銀 22199-08-2漢黃芩苷磷脂酰絲氨酸(PS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)98%
磺胺嘧啶銀 22199-08-2千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖酸苷成纖維細胞生長因子10(FGF10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)98%
9-UndecynoicAcid 22202-65-9黃獨素B白介素2(IL2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)90%
雙羥萘酸噻嘧啶 22204-24-6西貝母堿白介素4(IL4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)超純級
硫化亞銅 22205-45-4木蝴蝶苷A載脂蛋白B48(APOB48)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)99%
硫化亞銅 22205-45-4木蝴蝶苷B受磷蛋白(PLN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法)99%
邦景奧葉茲基氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒說明書葡糖胺鹽酸鹽TRPV2/VRL1 辣椒素受體樣蛋白1抗體 100 ul
N-乙酰-葡萄糖胺DICER1/Dicer 核糖核酸酶Dicer抗體 100 ul
纖維二糖Cullin 4B CUL4B蛋白抗體 100 ul
D-樹膠糖TIAM1 T淋巴瘤侵襲轉移誘導蛋白1抗體 100 ul
L-樹膠糖SRD5A2 類固醇5α還原酶2抗體 100 ul
D-樹膠糖ANAPC1 細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體 100 ul
阿拉伯樹脂AGEs 晚期糖基化終末產物抗體 100 ul
加拿大樹香脂Calpastatin 鈣蛋白酶抑制蛋白抗體 100 ul
氨酸乙酯TRPC3 色氨酸相關蛋白3抗體 100 ul
木糖RAB7 RAS癌基因相關蛋白RAB7抗體 100 ul
D(+)木酮糖Septin 2/Sept2/NEDD5 神經前體細胞表達發育下調蛋白5抗體 100 ul
戊五Prkg1/cGKI cGMP依賴性蛋白激酶1抗體 1Kit
膽甾PP2A beta/PPP2CB 蛋白質磷酸酶2B抗體 PP2A β PP2A-β 100 ul
膽甾乙酸脂PSCD1 細胞附著蛋白PSCD1抗體 20 ul
膽固氯化物GABRA5/GABA A Receptor alpha 5 γ1氨基丁酸受體α5/GABRα5抗體 100 ul
操作程序:
由您提供該實驗中目的基因的相關資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務的可能性和技術路線;
商定服務收費、付款方式、服務期限等,并簽定技術服務合同。
有您提供實驗所需的足夠量的實驗樣本(100mg組織或107個細胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進行RNA抽提、RNA定量、反轉錄、Real-time PCR擴增、數據分析。
產品僅用于科研提供實驗報告,包括實驗過程、所用儀器試劑、擴增曲線、標準曲線和相關分析數據等。