非酶DNA清除劑-2

產品及特點
用等方法提取的細胞總RNA樣品中經常會含有基因組DNA污染，這些污染會影響下游的RT-PCR和Northern雜交等實驗。目前最常用的RNase-free DNase處理方法因DNase中所含殘留的RNase能破壞RNA完整性而具有很大缺陷。開發的非酶DNA清除劑-2不但徹底避免了RNase-free DNase的這一缺陷，同時還具有操作快速，穩定性好和性價比高等諸多優點，完全可以替代價格昂貴的RNase-free DNase。
1. 高效，能使總RNA中的基因組DNA污染降上百倍（根據PCR檢測）而RNA分子完整性不會受到任何影響。
2. 本身不含RNase污染。
3. 快速，全部操作在樣品管中完成，只需要十多分鐘。
4. 穩定，本產品為非酶產品，可以常溫運輸和4℃長期保存；而RNase-freeDNase的運輸和長期保存必須在低溫進行。
5. 性價比高，單位成本遠低于RNase-free DNase。
6. 可以用于小RNA中DNA污染的清除。
使用及效果
將總RNA與本產品溶液A按1:1的比例混合后加1/2體積的自備氯仿，振蕩后室溫離心1-3分鐘，加兩倍體積的溶液B，混勻后離心10分鐘，用1 mL 75%的乙醇洗滌沉淀一次后即得RNA沉淀。

產品及特點

由于血液富含RNase，因此血液RNA非常容易降解，是臨床分子生物學研究中的一個棘手的問題。為解決此問題，本公司在非凍型組織RNA保存液的基礎上，開發了本產品，它具有下列特點:

1. 能快速滲透到新鮮血液細胞內，抑制RNA分子的降解。保存的血液RNA常溫可放置3天，4℃可放置5天，-20℃可放置3個月。

2. 操作簡單，直接將本產品和新鮮血液細胞沉淀按比例混合即可。

3. 適用于人新鮮血和哺乳動物新鮮血液，不適用于陳舊血液和凍凝血液，也不適用于禽類血液和其他動物血液。

4. 重復性好，效果跟進口同類產品相當。

5. 保存的樣品可直接用本公司血液RNAout提取RNA。

使用及效果

將本產品與新鮮血液樣品按4:1的比例（4份本產品加1份新鮮血液）混合后即可放置。放置結束后將樣品轉移到離心管中，5000 g室溫離心1分鐘，小心吸出淺粉紅色的上清液，棕紅色沉淀（血細胞和蛋白沉淀）直接用于后續的總RNA提取。

1. 新鮮細胞：如果試劑沒有問題，且外源性污染也可以排除，那么降解幾乎都來自裂解液的用量不足。如果將裂解液直接加入培養皿中裂解細胞，一定要使裂解液能覆蓋住細胞。

2. 新鮮組織：某些富含內源核酸酶的樣品(如肝臟，胸腺等)，即使使用電動勻漿器勻漿也不能避免RNA的降解。更可靠的方法是：在液氮條件下將組織研碎，并且勻漿時使用更多裂解液。

3. 冷凍樣品：樣品取材后應立即置于液氮中速凍，然后移至-70℃冰箱保存。樣品決不能未經液氮速凍而直接保存于-70℃冰箱中。冷凍樣品，即使是冷凍細胞，如果不在液氮條件下研磨碎，而直接加入裂解液中勻漿，RNA也比新鮮樣品更容易降解。樣品在與裂解液充分接觸前決不能出現融化，所以研磨用具必須預冷，在碾磨過程中要及時補充液氮。樣品研碎后，在液氮剛剛揮發完時，將樣品迅速轉移到含裂解液的容器中，立即混勻勻漿。

4. 外源RNA酶的污染：試劑，器械及實驗環境中的RNA酶進入實驗系統,可考慮華越洋產品：外源RNA酶清除劑（RNase remover)解決。

5. 內源RNA酶的污染：抑制劑失效或者用量不夠，實驗樣品過多；勻漿時溫度過高。

RNA提取得率低

1. 該組織或者細胞中RNA含量偏低：不同細胞和組織中RNA的豐度不同，如肝臟，胰腺，心臟等是高豐度組織(總RNA含量2-4μg/mg)，腦，胚胎，腎臟，肺，胸腺，卵巢等是中豐度組織(總RNA含量0.05-2μg/mg)，膀胱，骨，脂肪等是低豐度組織(總RNA含量<0.05μg/mg)。

2. 組織起始量太少或者太多：樣品量過少，則細胞組織中RNA含量較低；樣品量過多則可能超過裂解液的裂解能力，裂解將不完全，從而導致RNA得率低。