一步法大提質粒DNAout

產品及特點

本產品是在分枝桿菌DNAOUT（CAT#:70702）基礎上開發的柱式升級 產品，具有下列特點：從水體中提取高純度的基因組DNA是水體環境監測非常重要的手段，但是由于水 體樣品存在腐殖酸、金屬離子等PCR抑制劑，從水樣中提取DNA一直比較棘手。為 解決此問題，本公司利用在核酸純化領域的豐富經驗和先進的純化技術開發了本產 品，它具有下列特點：本產品是整合土壤DNAOUT（CAT#：60701）和柱式腐殖酸清除劑 （CAT#：60801）兩個產品而得的柱式升級產品，它結合了兩者的優點，專門用 于從各種土壤樣品和河海沉積物中提取高質量的DNA的試劑。本產品是在天凈沙細菌DNAOUT基礎上開發的柱式升級產品，可以用 于絕大多數革氏陽性和陰性細菌基因組DNA的快速提取。本產品是在一步裂解式質粒DNAOUT（CAT#：70903）基礎上開發的、 能夠快速從100 mL左右的E.coli培養液中取質粒DNA的產品。它只需要一種溶液即 可以完成細菌裂解，并且裂解物可以直接上柱純化質粒DNA。它比經典的堿變性質 粒制備方法更加快捷和方便。本產品的主要特點是： 1. 快速，整個質粒DNA提取過程只需要不到30分鐘，比傳統的堿變性方法快捷。
2. 超螺旋比例高，獨創的非堿法一步式細菌裂解技術，避免了強堿對DNA的損 害，得到的質粒DNA切口更少。
3. DNA純度高，幾乎沒有基因組DNA和RNA污染，OD260/280一般在1.7-1.9 之間。
4. DNA可以直接用于電泳、酶切、PCR、細菌轉化、分子克隆等實驗。
5. 大吸附量為600 mg DNA，具體產率取決于質粒拷貝數。
6. 過程簡單，重復性和穩定性好。
規格及成分 成 份 編 號 大紙盒包裝 
溶液 A LM70903a 70 mL 大離心吸附柱 LM90303 5 套 專用洗柱液 LM70903b 50 mL×2 DNA 洗脫液 2.0 111205 10 mL 使用手冊 71101sc 1 份

運輸及保存 常溫運輸及保存（溶液 A 需要 4℃保存），有效期一年。 

自備試劑 無

使用方法 1. 用 50 mL 離心管分數次收集 10-60 mL 新鮮的菌液，一般可以 5000 rpm離心 10 分鐘，去除上清即得細菌沉淀。

2. 往細菌沉淀中加入 14 mL 溶液 A，充分振蕩懸浮或吹打混勻。注意：充分重懸細胞沉淀（無塊狀物）對于獲得高的質粒產量十分重要。

3. 將裂解液全部轉移到大離心吸附柱中，放入到配套的收集管中。

4. 6000 rpm 離心 5-10 分鐘，棄穿透液。離心過濾柱將吸附溶液中的質粒DNA，而將基因組 DNA 和雜質在穿透液中。如果離心吸附柱中還有未離心下去的裂解液，可以適當延長離心時間直到離心吸附柱中沒有殘留液體。

5. 將 10mL 通用預洗液加入到離心吸附柱中，室溫靜置 2 分鐘后 6000 rpm離心 5 分鐘，棄穿透液。

6. 重復上步一次。

7. 將 10mL 通用洗柱液加入到離心吸附柱中，室溫靜置 2 分鐘后 6000 rpm離心 5 分鐘，棄穿透液。

8. 重復上步一次。

9. 室溫 6000 rpm 空甩 5 分鐘，棄穿透液。注意：此步很重要，不能跳過。

10.將離心吸附柱放入一個自備的、干凈的 50 mL 塑料離心管中，加 1 mL 通用洗脫液（洗脫液如加熱到 50-65℃效果更佳），室溫靜置 2 分鐘后 6000rpm 離心 5 分鐘，收集液即是質粒 DNA 溶液。

11.重復上步 1 次以便洗脫更多的質粒 DNA。

12.合并所得質粒 DNA，立即使用或-20℃儲存