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主營產品: elisa試劑盒
P-CP試劑盒-型前膠原羧基端原肽-ELISA檢測試劑盒
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PⅡCP試劑盒-Ⅱ型前膠原羧基端原肽 ELISA檢測試劑盒
- 產品名稱:Ⅱ型前膠原羧基端原肽(PⅡCP) ELISA 試劑盒
- 產品編號:HZ-PIICP-Hu
- 產品規格:96T/48T
- 實驗方法:雙抗夾心法
- 檢測范圍:31.25-2000pg/mL
- 最低檢測限:13.6pg/mL
- 保質期:12個月
- 附件下載:說明書
產品描述
試劑名稱 | 數量 | 試劑名稱 | 數量 |
96孔板(預包被) | 1 | 96孔板覆膜 | 2 |
標準品 | 2 | 標準品稀釋液 | 1×20mL |
檢測溶液A | 1×120μL | 檢測稀釋液A | 1×12mL |
檢測溶液B | 1×120μL | 檢測稀釋液B | 1×12mL |
TMB底物 | 1×9mL | 終止液 | 1×6mL |
濃洗滌液(30×) | 1×20mL | 使用說明書 | 1 |
需自備的設備及試劑
450±10nm濾光片的酶標儀(建議儀器使用前提前預熱)單道或多道微量加液器及吸頭
稀釋樣品的EP管
蒸餾水或去離子水
吸水紙
盛放洗液的容器
試劑盒的儲存及有效期
未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液,終止液保存于4℃,其他試劑保存于-20℃。使用后的試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存,開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃,避免潮濕。
穩定性
經測定,試劑盒在有效期內按推薦溫度保存,其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響,實驗室的環境條件需盡量保持一致,尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
注意:
試劑盒內酶標條可拆卸,按實驗需求可分多次使用;使用后的剩余試劑盒建議在首次實驗后 1個月內使用完畢。產品過期時間以盒子上的標簽為準,保質期內所有組分都確保是穩定的。
液體樣本的收集
1、血清:用無菌管收集,室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,2-8℃條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2、血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,2-8℃條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3、尿液:用無菌管收集,2-8℃條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
4、胸腹水:用無菌管收集,2-8℃條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5、腦脊液:用無菌管收集,2-8℃條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6、唾液:用無菌管收集,2-8℃條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
7、細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。2-8℃條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
8、牛奶:用無菌管收集,2-8℃條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
9、蜂蜜:用無菌管收集,2-8℃條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
10、全血:用含有抗凝劑的無菌管收集,立即輕輕搖動,來回輕輕顛倒數次,使血液和抗凝劑混勻,以防血液凝固。
固體樣本的收集
1、組織標本:切割標本后,稱取 1g 組織,加入 9ml 的 pH7.2-7.4 左右的 PBS,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。對于植物組織,不好勻漿的話,就在液氮中充分研磨。
2、細胞內蛋白樣本:許多待測蛋白不是分泌蛋白,而是存在于細胞內的蛋白,這個時候,要先收集細胞,洗滌干凈,再破碎細胞,離心取上清。
(1)培養的細胞
A、動物細胞:用 PH7.2-7.4 的 PBS 稀釋細胞懸液,使細胞濃度達到 100 萬/ml 左右。通過反復凍融(如果反復凍融,破碎效果不好,就采用超聲波破碎),以使細胞破壞并放出細胞內成份。2-8℃條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
B、植物細胞:用 PH7.2-7.4 的 PBS 稀釋細胞懸液,使細胞濃度達到 100 萬/ml 左右,置于冰盒上,用超聲破碎儀,設置破碎 2s,冷卻 30s 的方式,充分破碎細胞,以使細胞破壞并放出細胞內成份。2-8℃條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)組織的細胞
切割標本后,稱取 1g 組織,加入 9ml 的 pH7.2-7.4 左右的 PBS,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。2-8℃條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),去除上清,再用 pH7.2-7.4左右的 PBS 小心洗滌沉淀的細胞三遍。再用上述的細胞破碎方法破碎細胞。
3、細胞內蛋白樣本:許多待測蛋白不是分泌蛋白,而是存在于細胞內的蛋白,這個時候,要先收集細胞,洗滌干凈,再破碎細胞,離心取上清。
4、咽拭子:加入 2ml 的 pH7.2-7.4 左右的 PBS,溶解咽拭子頭部,搖勻,用鑷子取出咽拭子并擠干液體,2-8℃條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。如果是測分泌蛋白,直接取上清檢測,測試細胞內蛋白,要破碎細胞。
5、植物標本:取組織塊(0.2g~0.5g)少可到 5~10mg 在冰冷的 PBS 中漂洗,濾紙拭干,準確稱重,放入 5ml 的勻漿管中;按重量(mg):體積(ml)=1:9 的比例加入 9 倍體積的勻漿介質于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊;勻漿的方式:手工勻漿,機器勻漿。 ① 手工勻漿:左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉動研磨數十次(6~8 分鐘),充分研碎,制成 20%的勻漿液。 ② 機器勻漿:用組織搗碎機 10000~15000 轉/分 上下研磨制成 10%組織勻漿,也可用內切式組織勻漿機制備(勻漿時間 10 秒/次,間隙 30 秒,連續 3~5 次,在冰水中進行,可適當延長勻漿時間),鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片(直接涂片、染色均可以),顯微鏡下觀察細胞是否破碎,若沒有則可延長勻漿時間。將制備好的 10%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機 4000 轉/分左右,離心 10~15 分鐘,取上清液進行測定。
特別提示:本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!