凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

參數規格：
人角膜上皮細胞【HumanEyes:NormalCornealEpithelialCells】
產品描述：人角膜上皮細胞分離自正常人角膜組織，主要功能：（1）角膜是唯一的無血管的組織，具有透明的特性和合成許多蛋白的功能。分三層細胞層，外層即是上皮細胞。（2）角膜上皮細胞能參與先天性免疫，能感應病原體存在并發出信號從而激活角膜防御系統。（3）角膜上皮細胞能高效表達醛脫氫酶，防止UV-和4-羥基壬烯醛對細胞造成傷害。公司提供的人角膜上皮細胞均來自新鮮組織，用于培養人角膜上皮細胞的組織采集于地方醫院，組織的采集根據公司批準的方案進行。細胞的培養采用公司專利產品人角膜上皮細胞培養試劑盒(HumanEyesPrimaCell:NormalCornealEpithelialCellsCatNo.3-0547)來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時保證質量的穩定。在公司技術部標準的操作流程下，人角膜上皮細胞細胞可以保持原代細胞的分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

實驗要點及說明 ：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養操作:
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。      
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據細胞數量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
小鼠神經干細胞 小鼠骨骼肌肌肉母細胞，Sol8細胞 S-180(腹水瘤細胞)Sulfo NHS SS Biotin質量規格：BRSulfo NHS SS Biotin

人腦瘤細胞;SF17四乙酰核糖(>98% (HPLC),BC)質量規格：>98% (HPLC),BCTetraacetylribose

CST3 Others Mouse 小鼠 CST3 / Cystatin-C / Cystatin-3 人細胞裂解液 (陽性對照) 硬脂酸鎂質量規格：BRMagnesium stearate

大鼠紋狀體神經元RN-s孔雀石綠鹽酸鹽(>90%,BS)質量規格：>90%,BSMalachite green hydrochloride

CD14 Others Rat 大鼠 CD14 人細胞裂解液 (陽性對照) 無水硫酸錳(>98%,BR)質量規格：>98%,BRManganese (II )sulfate anhydrous
艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich 小鼠腎小管平滑肌細胞完全培養基 100mL氯化血紅素;血晶素Hemin質量規格：0.98

人羊膜上皮細胞 Human5- 羧基熒光素二乙酸酯；5-CFDA5-Carboxyfluorescein diacetate質量規格：0.95

EFNB1 Others Mouse 小鼠 EFNB1 / Ephrin-B1 人細胞裂解液 (陽性對照) 5(6)-羧基熒光素二乙酸酯5(6)-Carboxyfluorescein diacetate質量規格：0.9

人心臟成纖維細胞-心房裂解物HCF-aa L5-氨基熒光素5-Aminofluorescein質量規格：>95%

CD276 Others Mouse 小鼠 B7-H3 / CD276 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-氨基熒光素6-Aminofluorescein質量規格：0.95
人氣管上皮細胞RNAHTEpiC miRNA5 μg五肽促胃液素，英文名或英文縮寫：Pentagastrin，級別：BR，98%，規格：100克

狗間葉干細胞(脂肪)(5×105)谷轉酶 Glutamic-Pyruvic Transaminase(≥75 uni... 9000-86-6 200UN 通用試劑

小耳豬肺細胞;SEP-L2酰炳同鐵 99.9+% Fqrric ccqtylccqtonctq 1404-18-1

615小鼠樹突狀細胞肉瘤瘤株;DCS 小鼠軟骨細胞完全培養基 100mL2-Ethoxybenzoylchloride2-乙氧基本甲酰錄100克AR

細胞名稱 種屬9007-34-5膠原蛋白 Type II(2-8°C)Collagens polypeptide
人角膜上皮細胞CM-M089小鼠皮膚肥大細胞完全培養基100mL葡萄球菌選擇性瓊脂110號100克

HFE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 Hemojuvelin / HFE2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) D-甘露糖 D-(+)-Mannose,≥99% 3458-28-4 25G 通用試劑

尿道上皮細胞培養基UCM-prf吲坐;1,2-二氮雜茚 Indczolq;1,2-Bqnzdiczolq;Bqnzopyrczolq;Isoindczolq 71-44-3

大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-5 膀胱鱗癌細胞，ScaBER細胞 OS-RC-2(腎癌細胞)6-嶙酸葡萄糖鋇鹽shēng huà shì jì容量：5克

EB病毒轉化的人B細胞;KMY09024165-57-5氘代溴本-D5BROMOBENZENE-D5
收到人角膜上皮細胞如何處理？
1、首先，觀察細胞培養瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯系（所拍照片將作為后續服務依據）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養瓶蓋，將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時，以便穩定細胞狀態。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態（所拍照片將作為后續服務依據）；建議細胞傳代培養后，定期拍照、記錄細胞生長狀態。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養瓶內培養基，預留5ml左右繼續培養，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養瓶內培養，補加培養基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續培養，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。

公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM原代細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩定。在公司生物技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態，進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。